通过手术切取组织活检或切除器官、组织活检，做出确切诊断。活检的指症、禁忌和实施方法，随所打算取样组织而异，淋巴结、皮肤、肝、肺、血运丰富的肉瘤等等均不同。

活检的第一要求是取样大小足够病理诊断之需要，有时为获得准确诊断，需要多处取材甚至反复活检。如临床疑为癌，一次阴性活检不得为凭，再次活检至关重要，甚至有时有的肿瘤需整个切除后能确定是否为癌（如直肠绒毛状肿瘤）。